Note

Fermented milks from Enterococcus faecalis TH563 and Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus LA2 manifest different degrees of ACE-inhibitory and immunomodulatory activities

Enterococcus faecalis TH563 和 Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus LA2 发酵乳的 ACE 抑制活性和免疫调节活性

Les laits fermentés par Enterococcus faecalis TH563 et Lactobacillus delbrueckii bulgaricus LA2 montrent différents degrés d’activités anti-ACE et immunomodulatrice

¹ Department of Experimental Veterinary Science, University of Padua, Legnaro, Padua, Italy
² Veneto Agricoltura, Istituto per la Qualità e le Tecnologie Agroalimentari, Thiene, Vicenza, Italy

^* Corresponding author (通讯作者): daniela.regazzo@unipd.it

Received: 21 May 2009
Revised: 27 January 2010
Accepted: 28 January 2010

Abstract

Milk proteins are precursors of biologically active components that are released by enzymatic proteolysis. Among the biological activities recognised in milk components, the angiotensin-I converting enzyme (ACE)-inhibitory and immunomodulatory activities are of great interest. In the present work the ACE-inhibitory and immunomodulatory activities were analysed in milks fermented by two bacterial strains isolated from Italian dairy products, Enterococcus faecalis TH563 or Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus (L. delb. bulgaricus) LA2. ACE-inhibitory activity was determined by an already established enzymatic method and immunomodulatory activity by the proliferation of bovine peripheral blood lymphocytes (BPBL) taken from nine cows. BPBL were incubated for 48 h with increasing concentrations of peptide fractions (< 5000 g·mol⁻¹) extracted from the two fermented milks. Concanavalin A (conA), a known activator of lymphocyte proliferation, was used as a positive control. Fermentation products from E. faecalis TH563 showed a significantly (P < 0.05) greater ACE-inhibitory activity than that obtained by L. delb. bulgaricus LA2 (69.43 ± 3.12% vs. 60.86 ± 1.01%). The immunomodulatory activity showed a large interanimal variability. Peptide fractions from milk fermented by L. delb. bulgaricus LA2 significantly inhibited BPBL proliferation at concentrations of 5, 25 and 50 μg·mL⁻¹ in the presence of conA (P < 0.01). E. faecalis TH563 did not significantly modify BPBL proliferation at any peptide concentration used. In conclusion, L. delb. bulgaricus LA2-fermented milk showed ACE-inhibitory and immunomodulatory activities, while E. faecalis TH563-fermented milk had high ACE-inhibitory activity, suggesting a possible use of these strains for determining bioactive properties in dairy products.

摘要

乳蛋白水解后的化合物是生物活性成分的前体，在这些生物活性化合物中，具有血管紧缩素-I 转移酶 (ACE) 抑制活性和免疫调节活性的化合物引起人们广泛的关注。 以分离于意大利乳制品的两株乳酸菌 Enterococcus faecalis TH563 和 Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus LA2 为目标菌株，研究了两株菌发酵乳制品的 ACE 抑制活性和免疫调节活性。采用酶法测定 ACE 抑制活性，以及根据牛外周血淋巴细胞 (BPBL) 增殖实验来评价免疫调节活性。细胞分别在有和无淋巴细胞增殖激活剂伴刀豆球蛋白 A (conA) 的两种发酵奶中孵化 48 h。 E. faecalis TH563 发酵乳比 L. delb. bulgaricus LA2 发酵乳的 ACE 抑制活性 (69.43 ± 3.12%; P < 0.05)高。 但是免疫调节活性在菌种之间表现出较大的可变性，含 conA 的 L. delb. bulgaricus LA2 发酵乳 (5–25–50 µg·mL⁻¹) 可以显著地抑制 BPBL 的增殖 (P < 0.01)，而在任何浓度下的 E. faecalis TH563 发酵乳都不能影响细胞的增殖。 因此，L. delb. bulgaricus LA2 发酵乳具有 ACE 抑制活性和免疫调节活性，而 E. faecalis TH563 发酵乳只具有 ACE 抑制活性。 因此这两株乳酸菌具有潜在用于乳品工业中生产生物活性肽。

Résumé

Les protéines du lait sont des précurseurs de composés à activité biologique, qui sont libérés par protéolyse enzymatique. L’inhibition de l’enzyme convertissant l’angiotensine-I (ACE) et l’activité immunomodulatrice sont des activités d’intérêt parmi les activités biologiques reconnues des composés du lait. Dans cette étude, les activités anti-ACE et immunomodulatrices ont été analysées dans du lait fermenté par deux souches bactériennes isolées de produits laitiers italiens, Enterococcus faecalis TH563 ou Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus LA2. L’activité anti-ACE était déterminée par une méthode enzymatique pré-établie, l’activité immunomodulatrice par la prolifération de lymphocytes de sang périphérique de bovin (BPBL), prélevés à partir de neuf vaches. Les BPBL étaient incubées pendant 48 h en présence de concentrations croissantes de fractions peptidiques (< 5000 g·mol⁻¹) extraites des deux laits fermentés. La concanavalin A (conA), un activateur connu de la prolifération des lymphocytes, était utilisée comme témoin positif. Le produit fermenté par E. faecalis TH563 montrait une activité anti-ACE significativement (P < 0,05) plus élevée que celle obtenue avec L. delb. bulgaricus LA2 (69,43 ± 3,12 %, vs. 60,86 ± 1,01 %). L’activité immunomodulatrice montrait une forte variabilité inter-animal. Les fractions peptidiques issues du lait fermenté par L. delb. bulgaricus LA2 inhibaient significativement (P < 0,01) la prolifération des BPBL aux concentrations 5, 25, et 50 µg·mL⁻¹ en présence de conA. E. faecalis TH563 ne modifiait pas significativement la prolifération des BPBL quelle que soit la concentration en peptides mise en œuvre. En conclusion, L. delb. bulgaricus LA2 produisait un lait fermenté avec des activités anti-ACE et immunomodulatrices, alors que E. faecalis TH563 produisait un lait fermenté à forte activité anti-ACE, suggérant une utilisation possible de ces souches pour apporter des propriétés bioactives dans les produits laitiers.