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All issues Volume 88 / No 2 (March-April 2008) Dairy Sci. Technol., 88 2 (2008) 257-265 Abstract
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Issue
Dairy Sci. Technol.
Volume 88, Number 2, March-April 2008
Page(s) 257 - 265
DOI https://doi.org/10.1051/dst:2008002
Published online 01 April 2008
Dairy Sci. Technol. 88 (2008) 257-265
DOI: 10.1051/dst:2008002

Freezing stallion semen in INRA96 $^{\circledR}$-based extender improves fertility rates in comparison with INRA82

Elodie Pillet1, 2, Florence Batellier1, Guy Duchamp3, Vincent Furstoss4, Yves Le Vern5, Dominique Kerboeuf5, Marianne Vidament1 and Michèle Magistrini1

1  INRA, UMR85 Physiologie de la Reproduction et des Comportements, 37380 Nouzilly, France; CNRS, 37380 Nouzilly, France; Université de Tours, 37041 Tours, France; Haras Nationaux, 37380 Nouzilly, France
2  IMV-Technologies, 10 rue Clemenceau, 61302 L'Aigle, France
3  INRA, UE992 Unité pluri-espèces d'expérimentation animale en physiologie de la reproduction et des comportements, 37380 Nouzilly, France
4  INRA, UE88 Insémination caprine et porcine, 86480 Rouillé, France
5  INRA, Service de Cytométrie en Flux, 37380 Nouzilly, France

(Received 20 November 2007 - Accepted 16 January 2008 - Published online 1 April 2008)

Abstract - The chemical composition of freezing extenders plays a major role in sperm cell survival during cryopreservation. In this study we compared two extenders for freezing stallion semen: INRA82 extender (as a control) versus INRA96 $^{\circledR}$ extender, both supplemented with egg yolk and glycerol. INRA82 contains milk, whereas INRA96 $^{\circledR}$ is a chemically-defined extender developed for fresh semen storage at 4 $^{\circ}$C or 15 $^{\circ}$C. Semen from 3 stallions (7 ejaculates per stallion) was frozen in both extenders. In vitro analyses of post-thaw motility of sperm cells (computer-assisted analysis) and of membrane integrity (flow cytometry analysis) were performed. Then a fertility trial was conducted. Inseminations were conducted in a total of 84 mare cycles. INRA96 $^{\circledR}$ extender supplemented with egg yolk and glycerol significantly improved per-cycle pregnancy rates compared with INRA82 (71% versus 40%, p < 0.01). In agreement with these fertility results, membrane integrity was better preserved in INRA96 $^{\circledR}$ than in INRA82. In contrast, motility parameters were significantly higher in INRA82 than in INRA96 $^{\circledR}$. Further research is needed to understand how INRA96 $^{\circledR}$ components protect sperm cells during the cryopreservation process and highly increase their fertility potential compared with INRA82 components.


Résumé - La congélation de semence d'étalon dans un milieu à base d'INRA96 $^{\circledR}$ améliore le taux de fertilité en comparaison avec le milieu INRA82
La composition chimique des milieux de congélation joue un rôle majeur dans le maintien de l'intégrité des spermatozoïdes au cours de la cryoconservation. Dans cette étude, nous avons comparé deux milieux pour congeler la semence d'étalon : le milieu INRA82 (utilisé comme milieu contrôle) versus le milieu INRA96 $^{\circledR}$, tous deux supplémentés de jaune d'oeuf et de glycérol. L'INRA82 contient du lait alors que l'INRA96 $^{\circledR}$ est un milieu chimiquement défini, mis au point pour la conservation de la semence à 4 $^{\circ}$C ou 15 $^{\circ}$C. La semence de 3 étalons (7 éjaculats par étalon) a été congelée dans ces 2 milieux. Des analyses in vitro de la mobilité des spermatozoïdes (analyse automatisée assistée par ordinateur), ainsi que de l'intégrité membranaire (analyse en cytométrie en flux) ont été réalisées. Une expérience de fertilité a ensuite été conduite. Un total de 84 cycles de juments a été inséminé. Les résultats ont montré que le milieu INRA96 $^{\circledR}$ supplémenté de jaune d'oeuf et de glycérol améliore significativement les taux de fertilité par cycle comparé au milieu INRA82 (71 % versus 40 %, p < 0.01). En accord avec ces résultats de fertilité, l'intégrité membranaire a été mieux préservée dans l'INRA96 $^{\circledR}$. Par contre, la mobilité des spermatozoïdes a été significativement plus élevée dans l'INRA82 que dans l'INRA96 $^{\circledR}$. Des recherches complémentaires sont conduites pour comprendre comment les composants du milieu INRA96 $^{\circledR}$ protègent les spermatozoïdes au cours du processus de cryoconservation et augmentent le potentiel de fertilité comparés aux composants du milieu INRA82.


Key words: cryopreservation / semen / INRA96 $^{\circledR}$ extender / fertility / stallion

Mots clés : cryoconservation / semence / milieu INRA96 $^{\circledR}$ / fertilité / étalon

Corresponding author: michele.magistrini@tours.inra.fr

© INRA, EDP Sciences 2008